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產品知識

臨床使用常見問題解答

分類：產品知識
作者：
來源：
發布時間：2021-12-03
訪問量：0

【概要描述】試劑為什么不能從冰箱中拿出后直接使用?
答：試劑溫度過低，在反應室內易發生冷凝集，從而影響結果的準確性。正確的方法是從冰箱取出試劑后，室溫平衡十分鐘左右。

臨床使用常見問題解答

分類：產品知識
作者：
來源：
發布時間：2021-12-03
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詳情

一、試劑為什么不能從冰箱中拿出后直接使用?

答：試劑溫度過低，在反應室內易發生冷凝集，從而影響結果的準確性。正確的方法是從冰箱取出試劑后，室溫平衡十分鐘左右。

二、凝膠卡存放的適宜條件？

答：溫度：18-25度保存；避免陽光直射。

三、為什么凝膠卡做抗人球實驗可免除洗滌?

答：因為RBC的密度遠大于血清中的球蛋白，在給定的離心條件下，當離心時，RBC的沉降速率遠大于球蛋白，故RBC首先和凝膠中的抗人球蛋白反應，而不受血清中的球蛋白干擾，從而可免除洗滌這一步驟。

四、為什么用凝膠卡要先加細胞后加血清?

答：因為加細胞的量要比加血清的量大，先加細胞，可以在反應腔內形成大而充分的反應界面，與后加入的血清反應效果良好。

五、鐮刀形紅細胞貧血病人在做血型配血時易出現假陽性，為什么？

答：正常的紅細胞有一定的變形性，可以通過小于其直徑的凝膠間隙，而鐮形紅細胞貧血的病人紅細胞變形能力降低，剛性增大，不能透過凝膠間隙，故出現假陽性。

六、嚴重感染的病人易出現假陽性，為什么？

答：病人血清或血漿中的白細胞過多，堵塞了凝膠間隙，從而影響了紅細胞的沉降，造成假陽性。

七、除第五、第六外微柱凝膠假陽性和假陰性反應常見原因

1. 假陽性反應可見于：

（1）未完全去除纖維蛋白原的血清標本，殘存纖維蛋白原在凝膠中成為纖維蛋白，阻礙紅細胞沉淀而浮于膠中或膠表面。

（2）被檢標本染菌也使紅細胞浮于膠中或膠表面。

（3）被檢紅細胞破碎，常見是因為紅細胞陳舊，此時即使應該是陰性結果，這是因為離心時微柱管離心力方向和該微管軸方向不一致，本應為陰性的結果的沉淀位置偏離，而擬弱陽性反應。

（4）離心后紅細胞沉淀在微柱凝膠管底及近底部一側，而不是在管底尖部。此為離心時微柱管離心力方向和該微管軸向方向不一致，本應為陰性結果的沉淀位置偏離而呈擬弱陽性反應。

（5）實驗室溫度低時，因凝膠顆粒活動性減少，單個紅細胞穿過時困難，易出現假陽性結果。

2. 假陰性反應。

（1）抗原或抗體過少、過弱。

（2）抗原、抗體比例不合適，如前帶或后帶的現象。

（3）離心力過大，使弱陽性成為陰性格局。

八、溶血反應現象有哪些原因及臨床意義

1. 實驗操作者錯誤或實驗標本有問題

發生溶血反應不一定就是抗原抗體特異性反應所致，可能的原因有：

（1）反應液是低滲透壓溶液；

（2）受過熱或過冷溫度影響；

（3）紅細胞或抗體被細菌等污染；

（4）其他使紅細胞破壞的物理、化學因素。

2. 可能是因為紅細胞抗原抗體溶血性反應

（1）紅細胞抗原與特異性抗體結合，激活補體，作用于紅細胞膜，使之破裂，發生溶血。

（2）紅細胞抗原與特異性抗體結合，未激活補體，但因受到血清中其他因子作用而溶血。

3. 溶血的臨床意義

一定不能將溶血標本認定是陰性反應，一定要將其記錄為溶血反應，不要記錄為陽性反應，更不能記錄為陰性反應。而且要高度警惕：

（1）發生溶血標本所相應的血液中可能存在陽性的紅細胞抗原抗體反應，對患者極有可能有危險，即可能是受供者血型不相容所致，此時抗體應明確為臨床有意義抗體。

（2）也極可能是在工作中那個步驟發生了錯誤。因此，一定不要輸用其標本已發生溶血的血液。首先要取新的一份血液，取其標本，應用傳統試管血凝法和微柱凝膠方法同時對比檢測，選擇相容的血液進行輸血；一定要在短期內繼續查找此次溶血的原因。

九、什么是IgG不完全抗體的Coombs試驗？

人紅細胞表面抗原與不完全抗體結合（常是IgG類抗體），即不完全抗體致敏紅細胞，由于該不完全抗體分子量小或和其兩個Fab段擴張角度小，不能使相鄰紅細胞橋聯，紅細胞仍是分散狀況，不出現肉眼可見的紅細胞凝集現象。在反應體系中，加入針對該抗體的抗體，即抗抗體，該抗抗體Fab段結合紅細胞上不完全抗體 Fc段，出現肉眼可見的紅細胞凝集現象。

十、什么是Coombs試驗的應用

1. 直接抗人球蛋白試驗；

（1）對新生兒溶血病（HDN）胎兒（嬰兒）紅細胞檢測；

（2）輸血反應；

（3）其他溶血性疾病；

2. 間接抗人球蛋白試驗；

（1）檢測體內不規則抗體；

① 妊娠婦女；

② 獻血者；

③ 受血者或有過輸血史的人；

（2）交叉配血試驗；

（3）對已發現抗體鑒定；

（4）對一些血型抗原的檢測，如D弱型，Kell 、Duffy 、Kidd和其他血型檢測。

十一、什么是完全抗體和不完全抗體？

在適當的介質（液體、凝膠等）中，能夠與相應特異性抗原出現肉眼可見的免疫反應（凝集反應、沉淀反應或溶血反應）的抗體，稱之完全抗體；在適當介質中，不能出現肉眼可見的免疫反應的抗體被稱之不完全抗體。IgM類抗體一般是完全抗體，IgG類抗體一般是不完全抗體，但IgG類抗體并不都是不完全抗體，一些 IgG抗體與其特異性紅細胞抗原結合，也出現肉眼可見的凝血反應或溶血反應。完全抗體和不完全抗體分類一般指抗體的免疫反應性質，即以能否出現肉眼可見免疫反應而區分。

十二、什么是規則抗體和不規則抗體？

人體內產生的抗體一般都是外來的自身體內部存在的抗原所免疫，產生的抗體，稱之為規則抗體。人體內抗體的特異性是針對自身體內已有的抗原，該類抗體稱之為不規則抗體。對ABO血型，A型人只有抗B，B型人只有抗A，O型人有抗A，B，AB型人沒有抗A和抗B，這些抗體為規則抗體；如果A型人有抗A，B型人有抗B，AB型人出現抗A或和抗B，血型血清學確定的ABO血型，如抗原弱表達的Ax型人，這些抗體為不規則抗體。D表性陽性人體內出現的抗D抗體，抗體如果經研究確定了該抗體是針對該人紅細胞表面所缺乏的D抗原表位（該D陽性紅細胞是D抗原表位部分缺失型）則該抗D是規則抗體。應強調，只有在免疫遺傳學，在抗原分子水平已經確定了是D抗原表位部分缺失型所產生的抗D之時，將該抗體，明確為規則抗體，但是在臨床上發出D抗原表型陽性人出現抗D在對其詳細深入研究之前，首先將其作為不規則抗體。

規則抗體和不規則抗體分類的根據是免疫遺傳學基本理論，即抗體產生的一般規則。

十三、什么是意外抗體和非意外抗體？

1. 在臨床血型血清學工作中發現的ABO血型不規則抗體，D表性陽性人體內出現的抗D抗體（不論是否已經確定其是D抗原表位不完全型），以及具有獲得型B型紅細胞的人檢測出的抗A等，都稱之意外抗體。意外抗體包括了在臨床血型血清學檢測中遇到的所有異常的"意外"抗體。反之，正常的，規則抗體均為非意外抗體。

2. 意外抗體和非意外抗體，分類主要是指臨床血型血清學檢測中遇到的異常、"意外"的抗體或者是正常的規律性抗體。D陰性人血清中檢出抗D抗體，不將其稱為意外抗體，因對D陰性人，應預料到并高度注意血清中可能有抗D抗體。

十四、什么是臨床有意義抗體和無意義抗體？

ABO 血型、Rh血型不相容輸血或胎母血型不相容妊娠等情況產生的ABO、Rh血型抗體，能夠引起輸血反應或新生兒溶血病，這類抗體都是臨床有意義抗體，凡是在臨床上能發生同種異體免疫反應，如溶血，血細胞減少等病癥的血型抗體，都是臨床有意義抗體。而對于有些血型系統，如P血型，即使是該血型不相容輸血或妊娠，可能產生P血型同種異體抗體，但并不發生溶血性反應和新生兒溶血病，此類抗體稱之臨床無意義抗體。臨床無意義抗體，指的是一般規律，在一般情況不產生同種異體血型免疫反應，但是個別情況，對少數病例可能產生病癥，甚至嚴重的輸血反應或新生兒溶血病，如MN血型。故臨床上不能將這些抗體絕對地稱之臨床有意義抗體或無意義抗體。

十五、有關Rh試驗的其他問題

我們將假陽性反應及假陰性反應做進一步說明。

一、假陽性反應，情況會導致紅細胞定型結果為假陽性。抗D為灰色；抗C為粉紅色；抗E為棕色；抗c為暗綠色；抗e為綠色；抗CDE為橘黃色。試劑中存在意外抗體，針對人群中出現頻率小于1%的抗原的抗體偶爾也會引起假陽性反應。這些抗體發生率低，即使是無輸血也常會有相應的抗體，抗體的混合物并不罕見，可能是除人紅細胞外的其他抗原刺激產生的。

二、下面情況可導致紅細胞定型出現假陰性結果。

（一）誤用錯誤的抗血清或其他一些顏色相近的試劑。

（二）試管中沒有加抗血清。

（三）一種特異性血清不能與抗原的某種變異形式反應。例如，抗e血清不一定與黑人中較常見的e抗原變異體反應。較少見的還有抗E血清也可能與EW抗原反應弱或不反應。

（四）抗血清主要含直接抗順式Rh抗原的抗體。用其檢查帶有獨立基因產生的個體抗原的紅細胞，其結果是不可靠的。較常見的抗C血清，其與R1或r，產生的抗原的反應總比Rz或Ry產生的C抗原反應強。

（五）沒有遵循試劑使用說明，而不正確地使用抗血清，例如，血清與紅細胞的比例不合算，孵育溫度或孵育時間不正確。

（六）離心后看結果時過度用力振搖試管，會使紅細胞的弱凝集消失。

（七）抗血清中免疫球蛋白會因污染、保存不當或過期而變質。尤其是化學修飾的IgG抗體容易被某些蛋白水解酶破壞，而細菌會產生此酶。

人體紅細胞上還可檢出300多個其他抗原。其中一些存在于其他組織內。系統抗原存在于除成熟紅細胞以外的大多數人體細胞或血小板上。臨床受血者產生抗體。

幾乎所有人的特定細胞系都有的抗原稱為高頻或“公共”抗原，其他一些稱為“私有”抗原。每個已知抗原都是檢查血清中特異抗體時發現的。供閱讀者參考

—-江陰力博醫藥生物技術研究所—

2015.03.25